Modelo intestinal in vitro para evaluar la adhesión bacteriana e internalización

Comienza con un inserto Transwell que contiene un cocultivo de células epiteliales y similares a copas.

Las células epiteliales forman uniones estrechas, mientras que las células similares a copas producen moco, replicando la barrera epitelial intestinal in vivo.

Toma una suspensión de la comunidad bacteriana oral que haya sido tratada con líquido intestinal simulado para imitar la digestión del intestino delgado.

Sustituye el medio de la cámara superior por la suspensión bacteriana.

Incuba con agitación para facilitar la adhesión bacteriana e interiorización.

Recoger el medio de la cámara superior que contiene bacterias no adherentes para ensayos de viabilidad posteriores.

Añade una solución disolvible de moco e incuba para solubilizar la mucosidad y liberar las bacterias adheridas.

Recoger la solución para un análisis más detallado de la viabilidad y adhesión bacteriana.

Lava las células con buffer y añade un detergente para desalojarlas.

Recoged la suspensión de la celda.

Haz un vórtice en la suspensión para lisar las células y liberar las bacterias internalizadas.

Centrifugar y recoger por separado los restos sobrenadantes y celulares para su análisis posterior.

Después de lavar y ajustar