Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 4:12 min. • August 31st, 2026
Comience con hepatocitos cultivados en un plato recubierto con colágeno.
Introduzca un complejo de agente de transfección con dos plásmidos: uno que lleva un genoma modificado del virus de la hepatitis B o VHB, y otro que codifica las proteínas estructurales virales.
Incubar para permitir la entrada del plásmido. Dentro de la célula, los genes virales se expresan para producir proteínas estructurales y un genoma de HBV modificado, que se ensamblan para formar partículas de HBV recombinante.
Sustituya el medio e incube para favorecer la producción y liberación de partículas virales.
Recolecte el medio y centrifugue para obtener un sedimento con los restos celulares.
Recolecte el sobrenadante y filtre para eliminar los restos residuales.
A continuación, agregue polietilenglicol y cloruro de sodio para precipitar las partículas virales.
Centrifugue para obtener el precipitado. Disuelva el precipitado en tampón y centrifugue para eliminar los residuos. A continuación, coloque la muestra sobre un cojín de sacarosa.
Realice una ultracentrifugación para sedimentar las partículas virales a través del cojín.
Retire el sobrenadante y resuspenda el sedimento en medio.
Filtre la suspensión y almacene el
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