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Microbiología
0 vistas • 2:29 min • August 31st, 2026
Tome larvas de mosquito de primeros estadios, que son susceptibles a la infección viral.
Transfiera las larvas a un vaso de precipitados que contenga agua desionizada.
Introduzca densovirus recombinante, diseñado para codificar un microARN que suprime los genes larvales diana. Incube.
Las larvas absorben el virus, el cual luego alcanza el intestino.
El virus ingerido atraviesa el epitelio intestinal y se disemina a otros tejidos.
El virus ingresa a las células larvarias mediante endocitosis y libera su ADN en el núcleo.
El ADN viral produce microARNs.
En el citoplasma, estos microARN se unen al complejo de silenciamiento inducido por ARN.
El complejo se une y escinde los ARNm larvarios diana complementarios, impidiendo la expresión y provocando el silenciamiento génico.
Después de la incubación, lave las larvas con agua desionizada para eliminar las partículas virales no ingeridas.
Transfiera las larvas a una placa fresca con alimento para su recuperación.
Las larvas de mosquito infectadas con el virus, con el gen diana silenciado, están listas para aplicaciones posteriores.
Lave tres veces 100 larvas de primer estadio de A. albopictus utilizando agua desionizada. Luego, transfiera las larvas a un vaso de precipitados que contenga 95 mililitros de agua desionizada.
Añada cinco mililitros de los stocks de rAaeDV e incube las larvas durante 24 horas a 28 grados Celsius. Para lograr una infección exitosa de las larvas, es esencial que las larvas estén en contacto con partículas virales de infección durante 24 a 36 horas para asegurar altas tasas de infección. Tras la incubación, lave las larvas tres veces utilizando agua desionizada y luego transfiera las larvas de vuelta a las placas. Alimente las larvas regularmente.