Visualización de cápsides virales sometidas a tratamiento térmico mediante microscopía electrónica de transmisión

Tome tubos que contienen cápsidas virales, que son partículas similares al virus pero sin material genético.

Caliente los tubos a una temperatura constante durante diferentes duraciones.

Una duración más corta de calentamiento estresa levemente las proteínas del capsido, mientras que un calentamiento prolongado altera el capsido y provoca agregación.

Enfríe rápidamente los tubos para evitar cambios estructurales adicionales.

Transferir el líquido sobre una película de parafina.

Coloque una rejilla de microscopía electrónica de transmisión (TEM) sobre la gota. Los capsidos se adhieren a la superficie de la rejilla.

Retire el exceso de líquido del grid con un papel de filtro.

Lave con un tampón para eliminar los capsidos débilmente adheridos, luego seque nuevamente la rejilla.

Sumerja en acetato de uranilo, un tinción con metal pesado que se une a la superficie del capsido, haciendo que estos aparezcan más oscuros al microscopio electrónico de transmisión (MET).

Seque el portaobjetos y colóquelo sobre una placa. Guarde la placa en un desecador para eliminar la humedad.

Obtenga imágenes de la rejilla mediante TEM para visualizar el daño en los capsidos inducido por el calor.

Realice el tratamien