Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:28 min. • August 31st, 2026
Tome un cultivo de bacterias espiroquetas modificadas genéticamente. Estas bacterias portan el gen de resistencia a la gentamicina.
Agregue una suspensión de bacteriófagos a la cultura bacteriana.
Los fagos portan ADN plasmídico que codifica un gen de resistencia a la kanamicina.
Incube la mezcla.
El bacteriófago se une a la superficie bacteriana e inyecta el ADN en la célula.
El plásmido se replica independientemente y se transmite cuando las bacterias se dividen.
Mezcle la cultura incubada con un medio de agarosa fundido suplementado con los antibióticos gentamicina y kanamicina.
Vierta la mezcla en una placa. Deje que solidifique y luego incube.
Bajo selección con doble antibiótico, solo las células que portan ambos marcadores de resistencia crecen y forman colonias, mientras que las células restantes mueren.
Seleccione una colonia e inóquela en un medio que contenga ambos antibióticos.
Incubar para facilitar el crecimiento de bacterias con el plásmido transducido para análisis posteriores.
Vierta el sobrenadante y resuspenda el precipitado en 14,5 mililitros de BSK fresco. Añada menos de o igual a 500 microlitros de muestra de fagos precipitados con PEG a la cultura del clon receptor.
Desp
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