Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:41 min. • August 31st, 2026
Comience con tubos que contienen células epiteliales pulmonares humanas.
Añada virus de la influenza biotinilados e incube en hielo. Los virus se unen a la superficie celular sin ser internalizados.
Centrifugar para separar las células unidas al virus, eliminar el sobrenadante y resuspender.
En el tubo del punto temporal inicial, agregue estreptavidina sin marcar, que se une a los virus biotinilados, formando complejos.
Añada estreptavidina marcada con fluoróforo, que no logra unirse al complejo de virus estreptavidina-biotina. Lave y fije las células.
Incube el tubo del punto temporal posterior a una temperatura más alta, permitiendo la internalización del virus, luego regrese al hielo.
Añada estreptavidina sin marcar y un agente que bloquea la internalización, el cual previene la absorción viral adicional, e incube. La estreptavidina se une a los virus biotinilados unidos a la superficie, luego lave.
Fije las células y agregue un tampón que contenga detergente para permeabilizarlas.
Lave y agregue estreptavidina marcada con fluoróforo, que ingresa a las células y se une a la biotina.
Analice las muestras mediante citometría de flujo.
Una mayor fluorescencia en el punto temporal posterior c
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