Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:08 min. • August 31st, 2026
Comience con un ratón anestesiado en posición supina, con la piel del tórax afeitada.
Desinfecte la piel afeitada.
Utilice imágenes de ultrasonido para visualizar el corazón e identificar la pared externa del ventrículo izquierdo.
Tome una microjeringa que contiene un virus recombinante que codifica un gen de prueba cuyo efecto se sospecha en la función cardíaca.
Bajo guía de ultrasonido, inserte la aguja en la pared ventricular.
Inyecte el virus en la capa muscular de la pared.
Realice una segunda y tercera inyección, dirigiéndose a diferentes sitios ventriculares para lograr una expresión génica más amplia.
Retire la aguja y permita que el ratón se recupere.
El virus se une a los receptores en las células musculares ventriculares, iniciando la endocitosis mediada por receptores y el transporte del genoma viral al núcleo.
La expresión del genoma viral conduce a la síntesis de la proteína codificada.
El modelo de ratón ya está listo para evaluar los efectos de la expresión génica inducida por virus en la función cardíaca.
Para comenzar, esterilice la región torácica inferior izquierda del ratón anestesiado con rondas alternadas de un antiséptico a base de yodo o clorhexidina, en alcohol, tres veces con movimiento circular. Bajo guía de imagen por ultrasonido, inserte la aguja de la jeringa que contiene el virus en el tórax del animal.
Acérquese con la punta de la aguja a la pared anterior libre del ventrículo izquierdo e inyecte lentamente de 10 a 15 microlitros del virus. Verifique la inyección exitosa en las imágenes de ultrasonido mediante el aumento del brillo cerca de la punta de la aguja. Retire la aguja del corazón e insértela en otras regiones del ventrículo izquierdo para una segunda y tercera inyección de la misma cantidad de virus.