Crecimiento viral en células epiteliales nasales humanas cultivadas en interfaz aire-líquido
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:17 min. • August 31st, 2026
Comience con células epiteliales nasales humanas cubiertas de moco, cultivadas en un inserto tipo transwell en una placa de múltiples pocillos.
El lado basal del cultivo está en contacto con el medio, mientras que la superficie apical está expuesta al aire, simulando la interfaz aire-líquido de la cavidad nasal.
Lave el cultivo con tampón para eliminar la capa de moco.
Agregue el coronavirus, suspendido en medio sin suero, a la cultura.
Incube la placa con agitación ocasional para asegurar la adsorción viral.
Retire el inóculo viral y lave con tampón para eliminar los virus no unidos.
Retire el inserto y reponga el pocillo con medio fresco.
Incube la placa para permitir la infección viral.
El coronavirus se une al receptor de la superficie celular, ingresa por endocitosis y libera su genoma en el citoplasma.
El genoma viral se replica y produce proteínas, las cuales se ensamblan en nuevos virus.
Se liberan nuevos virus en la parte apical, se diseminan para infectar células cercanas y amplifican el crecimiento viral.
Cultive y diferencie las interfases aire-líquido nasales, o cultivos ALI, en transbienales que tengan una cámara basal y una apical. Amplíe las células sinonasales humanas disocia
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