Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:51 min. • August 31st, 2026
Tome vectores lentivirales que contienen el antígeno p24 del VIH-1, un marcador proteico utilizado para la detección.
Agregue un detergente para lisar y liberar p24, luego diluya la muestra en forma seriada.
Tome una microplaca recubierta con anticuerpos monoclonales anti-p24 y un agente bloqueante para prevenir la unión no específica.
Agregue las diluciones de la muestra y los estándares de p24 como referencias.
Incubar para permitir la interacción del p24 con los anticuerpos a través de un epítopo específico, luego eliminar los componentes no unidos.
Incubar con anticuerpos policlonales anti-p24 que se unen a diferentes epítopos en p24. Eliminar cualquier anticuerpo no unido.
Añada anticuerpos marcados con peroxidasa que se unan a los anticuerpos policlonales. Elimine los anticuerpos no unidos.
Añada un sustrato de peroxidasa que se convierta en un producto coloreado.
Agregue un ácido para inactivar la peroxidasa y estabilizar el producto.
Mida la absorbencia correspondiente a la intensidad del color, que es proporcional a la concentración de p24.
Genere la gráfica estándar y estime las concentraciones de las muestras para determinar la titulación viral.
Recubra una placa de 96 pozos de uni
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