Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:44 min. • August 31st, 2026
Comience con una mezcla de plásmidos suspendidos en un medio nutriente.
El primer plásmido porta un genoma viral adenoasociado recombinante (AAV) que codifica el gen de interés.
El segundo plásmido codifica las proteínas Rep y Cap.
El tercer plásmido codifica proteínas auxiliares.
Agregue un agente de transfección a la solución de plásmido. Mezcle bien e incube.
El agente de transfección con carga positiva se une al ADN plasmídico con carga negativa, formando complejos.
Introduzca los complejos en una monocapa de células de mamífero. Incube.
Los complejos ingresan a las células mediante endocitosis.
En el interior de las células, los genes codificados por el plásmido inducen la expresión de proteínas virales.
La proteína Rep replica el genoma viral, mientras que las proteínas Cap forman las cápsides.
La proteína Rep, junto con las proteínas auxiliares, empaqueta el genoma viral replicado en los cápsides, formando partículas completas de AAV.
Los vectores virales adenoasociados recombinantes que portan el gen de interés están listos para aplicaciones de entrega génica.
Después de generar los constructos rAAV9 y cultivar las células HEK293 según el protocolo descrito, para transfectar las célul
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