Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:52 min. • September 30th, 2026
Comience con un cultivo bacteriano que porten un genoma de profago integrado, reprimido por una proteína represora del fago, manteniendo así una fase lisogénica inactiva.
Agregue un inductor e incube con agitación para inducir estrés celular.
El estrés celular induce la autocleavage de la proteína represora, lo que permite al profago transitar de la lisogenia a la replicación lítica.
El ADN del profago se excinde del genoma bacteriano y transcribe secuencialmente los genes reguladores tempranos, los genes de replicación del ADN intermedios y los genes estructurales y de lisis tardíos.
Transfiera el cultivo a un volumen grande de medio para diluir el inductor e incube para permitir la recuperación celular.
En intervalos definidos, añada una solución de parada para detener la transcripción y preservar el perfil de ARN en las células bacterianas.
Centrifugue la cultura y deseche el sobrenadante. Resuspenda las células, transfiera la suspensión a un tubo pequeño y centrifugue.
Retire el sobrenadante y congele rápidamente el pellet para mantener la integridad del ARN.
Finalmente, agregue un reactivo de extracción de ARN y homogenice para romper las células. La muestra está lista para el aislami
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