Recolección de virus adenoasociado de células mamíferas transfectadas

Comience con una cámara de células multicapa que contenga células mamíferas transfectadas que produzcan vectores de virus asociados a adenovirus. La cámara de células ayuda a generar una cosecha viral de alto rendimiento.

Agite vigorosamente el recipiente para desprender las células adherentes, liberando así las células que contienen el virus y las partículas virales extracelulares en el medio.

Transfiera el contenido a un tubo y centrifugue para obtener un sedimento de las células que contienen el virus.

Recolecte el sobrenadante que contiene el virus extracelular y transfiéralo a un frasco de almacenamiento.

ReSuspender el precipitado en tampón de lisis e incubar.

Las enzimas y los detergentes en el tampón rompen las células y liberan los virus intracelulares intactos en la solución.

Centrifugue el lisado para sedimentar los restos celulares. Recopile el sobrenadante que contiene el virus y añádalo al mismo frasco de almacenamiento que contiene el virus extracelular.

Guarde la suspensión viral cruda a baja temperatura hasta su posterior purificación.

Después de la incubación, agite vigorosamente la cámara de cultivo celular para desprender las células hasta que el medio se vea turbio, y