Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:25 min. • September 30th, 2026
Tome una placa de múltiples pocillos que contenga células epiteliales mamíferas.
Preparar diluciones seriadas de un pseudovirus que contiene proteínas de espiga del coronavirus.
Sustituya el medio por una suspensión viral diluida en cada pocillo.
Incube con agitación ocasional para permitir que las proteínas de la espícula viral se unan al receptor de la célula huésped.
Retire el medio. Añada un medio que contenga metilcelulosa para formar una capa semisólida que restrinja la diseminación viral, e incube.
El virus entra en la célula y libera su genoma de ARN.
El ARN dirige la síntesis de nuevo ARN viral y proteínas, que se ensamblan en partículas virales que salen de la célula.
Los virus liberados infectan células vecinas, produciendo una zona clara denominada placa.
Retire la capa superior y lave las células.
Agregue un colorante e incube la placa con agitación.
Lave y seque los pozos.
El colorante tiñe las células, mientras que las placas permanecen claras.
Cuente las placas visibles en cada pocillo para determinar la concentración viral.
Para determinar la titulación viral, siembre células Vero E6 en placas de seis pocillos a una densidad de siembra de seis veces 10 a la quinta células por p
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