Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 4:56 min. • September 30th, 2026
Tome una placa de múltiples pocillos con suero de paciente inactivado por calor que contenga anticuerpos específicos contra el coronavirus en el pocillo de prueba. Incluya suero humano sano como control.
Agregue pseudovirus que expresan proteínas de espiga de coronavirus y portan ARN que codifica la proteína verde fluorescente a las muestras de suero, e incube.
En el pocillo de prueba, los anticuerpos se unen a las proteínas de espiga y neutralizan los pseudovirus, mientras que en el pocillo control, los anticuerpos no específicos no se unen a las proteínas de espiga, dejando los pseudovirus sin unir.
Agregue la mezcla a monocapas de células epiteliales. Incube para la adsorción viral.
Añada medio semisólido de recubrimiento a cada pocillo para restringir la difusión viral. Incube.
En el control, los pseudovirus no ligados se unen a los receptores celulares, ingresan a las células, liberan ARN y expresan GFP, formando foci fluorescentes de infección.
En el pocillo de prueba, los pseudovirus neutralizados por el anticuerpo no logran entrar en las células, impidiendo la formación de focos de infección.
Bajo un microscopio fluorescente, cuente los focos de infección fluorescentes.
Ausencia de
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