Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 4:09 min. • September 30th, 2026
Comience con una placa multipozo que contenga células de mamífero expuestas a un virus vaccinia recombinante.
El virus recombinante codifica proteínas fluorescentes verde, roja y azul, cada una controlada por un promotor específico de etapa para rastrear las etapas temprana, intermedia y tardía de la expresión génica, respectivamente.
El virus ingresa a la célula mediante endocitosis mediada por receptores y libera su núcleo viral al citoplasma.
La maquinaria transcripcional en el núcleo viral impulsa la expresión de genes tempranos, marcada por fluorescencia verde.
Las proteínas tempranas median en la desencapsulación del genoma, liberando el ADN viral en el citoplasma, donde la ADN polimerasa replica el genoma viral.
A continuación, la expresión de genes intermedios, indicada por la fluorescencia roja, produce factores de transcripción esenciales para la activación de genes tardíos.
Luego, la expresión de genes tardíos, indicada por la fluorescencia azul, genera proteínas estructurales necesarias para la formación de viriones maduros.
Añada un fijador e incube brevemente para preservar la fluorescencia.
Elimine el fijador y luego agregue un tampón.
Utilice un espectrofotómetro para medir
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