Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:08 min. • September 30th, 2026
Comience con un plásmido de minigenoma que imita el genoma del virus del Ébola y codifica proteínas estructurales virales, glicoproteínas y un reportero luciferasa.
Agregue plásmidos auxiliares que codifican la polimerasa T7, la nucleoproteína viral y los componentes de la polimerasa viral esenciales para la replicación y la transcripción.
Agregue un reactivo de transfección basado en lípidos a los plásmidos, vortexee brevemente y incube la mezcla para formar complejos plásmido-lípidos.
Añada esta mezcla a células de riñón humano, mezcle suavemente e incube.
El complejo lipídico se fusiona con la célula. Los plásmidos ingresan a la célula.
Los plásmidos auxiliares codifican sus respectivas proteínas.
Posteriormente, la polimerasa T7 transcribe el minigenoma en ARN genómico viral, que se recubre inmediatamente con nucleoproteínas.
El complejo de la polimerasa viral se une al ARN genómico viral y lo transcribe en ARNm virales. Estos ARNm producen proteínas estructurales y glucoproteínas virales.
Las proteínas virales se ensamblan para formar partículas virales similares a virus, no patógenas y competentes para la transcripción y replicación, o trVLPs, que contienen el gen reportero de lucife
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