Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:44 min. • September 30th, 2026
Comience con una placa de múltiples pocillos que contenga una dilución seriada del compuesto de prueba para evaluar la actividad antiviral.
Agregue una suspensión de células de riñón embrionario humano que contenga el virus del sarampión recombinante que expresa luciferasa a cada pocillo.
Incubar para permitir que las células se adhieran al fondo de cada pocillo.
En el pocillo de control sin el compuesto de prueba, el virus se fusiona con la membrana celular y libera su genoma al citoplasma.
El genoma viral dirige la producción de ARN y proteínas virales, junto con la proteína reportera luciferasa.
En los pocillos de prueba, el compuesto antiviral inhibe la replicación viral, reduciendo la producción de luciferasa.
Añada un sustrato específico para luciferasa a cada pocillo, el cual interactúa con la luciferasa y emite luminiscencia.
Utilice un lector de placas para medir la intensidad de luminiscencia en cada pocillo.
Una menor luminiscencia en los pozos de prueba en comparación con el pozo control indica inhibición viral.
Una disminución progresiva de la luminiscencia con el aumento de la concentración del compuesto muestra una inhibición dependiente de la dosis de la replicación viral.
Añ
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