Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:01 min. • September 30th, 2026
Comience con un pocillo de prueba que contenga células tumorales modificadas genéticamente que expresan un antígeno diana, y un pocillo control con células tumorales que carecen del antígeno.
Tome un enganchador bispecífico de células T (BTE) codificado por un transgén viral, con dos sitios de unión, uno para el antígeno diana y otro para un receptor específico de células T.
Agregue el BTE y las células T a los pocillos e incube.
En la muestra de prueba, el BTE une al tumor y a la célula T, activando a la célula T para liberar gránulos citolíticos.
Esto lisa la célula tumoral, liberando una enzima intracelular.
En el control, el BTE se une solo a la célula T, evitando la lisis de la célula tumoral.
Centrifugar y recolectar el sobrenadante.
Añada un sustrato e incube.
La enzima cataliza el sustrato en un producto de color rojo.
Añada una solución de paro y mida la intensidad del color.
Una mayor intensidad en la muestra de prueba confirma la actividad inmunomoduladora específica del objetivo del BTE.
Para comenzar la evaluación de la citotoxicidad mediada por células inducida por BTE mediante la liberación de LDH, primero aísle los productos del transgén secretados expresados por las células d
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