Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:56 min. • September 30th, 2026
Tome una suspensión que contenga una mezcla diversa de virus, junto con contaminantes como partículas virales defectuosas que carecen de ácidos nucleicos.
Estos virus se tiñen previamente con un colorante fluorescente que se une al ácido nucleico para distinguir los virus con genomas de los contaminantes.
Pase la suspensión a través de un citómetro de flujo activado por fluorescencia, donde cada partícula se analiza en cuanto a dispersión de la luz e intensidad de fluorescencia.
La señal de dispersión de luz refleja el tamaño de la partícula, mientras que la intensidad de fluorescencia indica el contenido de ácidos nucleicos.
Excluya contaminantes que no muestren fluorescencia y agregados que presenten fluorescencia anormalmente alta.
Seleccione partículas virales individuales que contengan un genoma y ordénelas directamente sobre una placa con cámara recubierta de agarosa para su inmovilización.
Cubra cada pocillo con agarosa adicional para embeber los virus.
Estos ya están listos para la amplificación y análisis del genoma de un solo virus.
Para ordenar virus mediante un citómetro de flujo equipado con tubos fotomultiplicadores de dispersión lateral personalizados o FSC-PMT, comience por
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