Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:35 min. • September 30th, 2026
Tome cultivos de células de mamífero. Inflija el cultivo de prueba con un virus, dejando el control sin infectar.
Permita la adsorción del virus, luego reemplace el medio.
El virus ingresa a la célula y libera su genoma. El virus expresa una proteína de virulencia que desestabiliza los complejos de factores de transcripción del hospedador y suprime la transcripción del hospedador.
Sin embargo, las células de control mantienen la transcripción activa.
Agregue un análogo de nucleósido que se incorpore a los ARN nascentes.
Recoger las células lavadas.
Fije las células para preservar su estructura. Centrifugue las células y lávelas con un tampón.
Agregue un detergente para permeabilizar las células, luego lave.
Añada un tinte fluorescente químicamente modificado que reaccione con el análogo de nucleósido para marcar los ARN recién sintetizados; luego lave.
Realice inmunotinción para marcar con fluorescencia antígenos virales, identificando así las células infectadas.
Utilice citometría de flujo para detectar la fluorescencia del ARN del hospedador y del antígeno viral.
Compare la intensidad de fluorescencia del ARN entre las poblaciones control y de prueba. Un desplazamiento hacia abajo en la pob
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