Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:44 min. • September 30th, 2026
Comience con una mezcla de plásmidos que contenga plásmidos auxiliares que codifiquen las proteínas de replicación y transcripción del VSR y un plásmido separado que lleve un ADNc de antigenoma completo del VSR que exprese GFP.
Cada plásmido se coloca bajo el control de un promotor T7.
Agregue un reactivo de transfección basado en liposomas e incube para permitir la formación de complejos.
Introduzca estos complejos en células de riñón de hámster modificadas genéticamente que expresan la ARN polimerasa T7 e incube.
Los complejos de plásmidos entran en las células, donde la ARN polimerasa T7 transcribe los plásmidos de RSV.
Esto produce ARN mensajeros virales que codifican proteínas de replicación y transcripción y genera ARN antigénomico de RSV de sentido positivo.
Utilizando la maquinaria del huésped, estos ARNm producen proteínas de replicación y transcripción virales que forman un complejo polimerasa funcional de VSR.
El complejo de la polimerasa del VSR luego convierte el ARN de sentido positivo en ARN genómico viral.
Este ARN genómico dirige la síntesis de ARN mensajeros virales, que codifican proteínas estructurales y GFP.
Bajo un microscopio de fluorescencia, la fluorescencia verde c
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