Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 4:32 min. • September 30th, 2026
Realice diluciones seriadas de una suspensión de virus respiratorio sincitial (RSV).
Inocule cada dilución en pozos separados de una placa de múltiples pozos sembrada con células de mamífero susceptibles al VSR.
Incubar para permitir que el virus se una a los receptores de la superficie celular, medie la fusión de membranas y libere su genoma en el citoplasma.
A continuación, aplique un medio de recubrimiento semisólido para restringir la difusión viral e incube.
Las células infectadas expresan la proteína viral de fusión que media la fusión de célula a célula, formando estructuras multinucleadas denominadas sincitios.
A medida que avanza la replicación viral, estos sincitios degeneran y forman zonas claras conocidas como placas.
Agite suavemente la placa para eliminar la capa de recubrimiento y enjuague las células para eliminar los restos.
Aplique un colorante para teñir las células viables, dejando las placas sin teñir.
Retire el colorante, descontamine la placa con lejía y enjuague con agua.
Deje que la placa se seque al aire.
Seleccione pozos con placas bien definidas y cuéntelas para determinar la titulación viral.
Para realizar un ensayo de titulación por placas, primero prepare medio
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