Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:31 min. • September 30th, 2026
Comience con una placa multipozos que contenga células epiteliales infectadas con un virus genéticamente modificado.
El virus lleva un transgén que codifica una enzima luciferasa.
Tome cultivos frescos de células epiteliales en una placa multiwell con paredes blancas.
Transfiera el sobrenadante que contiene concentraciones desconocidas de virus a los pozos de paredes blancas.
Simultáneamente, agregue concentraciones conocidas del virus como estándares.
Centrifugue la placa para favorecer el contacto cercano entre las partículas virales y los receptores de la superficie celular del huésped, e incube.
El virus entra en la célula huésped y entrega su genoma de ARN de cadena negativa.
La polimerasa del ARN viral luego transcribe el genoma en ARNm.
Utilizando la maquinaria celular del huésped, el ARNm se traduce en proteínas virales, incluida la luciferasa.
La cantidad de luciferasa acumulada dentro de la célula huésped aumenta con la concentración viral creciente.
Las muestras están listas para una estimación adicional de las concentraciones virales utilizando el ensayo de luciferasa.
Prepare una curva patrón de VSV-Delta-51 en DMEM sin suero de modo que la concentración final de unidades formado
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