Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:41 min. • September 30th, 2026
Tome un tubo que contenga un cultivo inicial de células de E. coli modificadas genéticamente, que portan el gen de la polimerasa T7 regulado por el operador lac junto con un plásmido de expresión.
El plásmido lleva un gen que codifica una proteína de capa derivada del bacteriófago Qβ.
Este gen está regulado por un promotor T7 y un operador lac.
Transfiera el cultivo a un matraz que contenga un medio.
Incubar con agitación para promover el crecimiento bacteriano.
Agregue un análogo sintético de la alolactosa que inactiva el represor lac, desencadenando así la expresión de la polimerasa T7.
La polimerasa T7 se une entonces al promotor T7 en el plásmido y transcribe el gen de la proteína de la cápside, que se traduce para producir la proteína de la cápside.
Estas proteínas de capa se autoensamblan en partículas similares a virus (VLPs) que forman andamios no infecciosos.
Transfiera el cultivo a los frascos de centrífuga.
Centrifugar para obtener el pellet de células.
Deseche el sobrenadante y transfiera el precipitado a un tubo.
El pellet celular, que contiene VLP intracelulares, está listo para la purificación.
Antes de comenzar el procedimiento para expresar el bacteriófago Q-Beta, limpie el ár
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