Preparación segura de muestras virales para microscopía electrónica de transmisión

Dentro de un gabinete de contención biológica, aspire una suspensión viral altamente contagiosa hacia una cápsula que contiene rejillas de MET.

Incubar en posición horizontal para ayudar a que los virus se adhieran de manera uniforme a lo largo de la rejilla.

Retire la suspensión con virus no unidos, luego agregue un fijador para entrecruzar las proteínas, lo que preserva la estructura viral y reduce la infectividad.

Después de la incubación, lave para eliminar el fijador residual.

Añada un colorante negativo denso a los electrones, que se une a las rejillas que rodean al virus y mejora el contraste durante la obtención de imágenes.

Retire la pipeta y seque las cuadrículas para eliminar el exceso de tinción.

Coloque la cápsula en un tubo de centrífuga con papel de filtro empapado en osmio tetraóxido, luego selle el tubo e incube para la fijación por vapor.

El tetraóxido de osmio estabiliza la estructura de la membrana lipídica, mejora el contraste de la imagen y inactiva completamente el virus, permitiendo su traslado seguro fuera del confinamiento biológico.

Dentro de una instalación de microscopía electrónica de transmisión, enjuague las rejillas, déjelas secar al aire y guárdelas para s