Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:37 min. • September 30th, 2026
Comience con una placa de múltiples pocillos que contenga células epiteliales infectadas con el virus del Zika, un virus de ARN de cadena sencilla.
Durante la infección, el virus libera el ARN que forma un intermediario de ARN bicatenario o ARN-dc.
Para detectar estos intermediarios de ARNdc, reemplace el medio con metanol para permeabilizar las células y preservar la integridad celular.
Elimine el metanol y lave con un tampón.
Añada una solución de bloqueo para evitar la unión no específica de anticuerpos.
Añada un anticuerpo primario específico para el ARNdc viral.
Incube con agitación suave a baja temperatura para permitir que el anticuerpo primario se una al ARNdc viral.
Lave con un tampón, agregue un anticuerpo secundario conjugado con un fluoróforo rojo e incube.
Los anticuerpos secundarios se unen a los anticuerpos primarios.
Lave con un tampón, luego agregue un colorante fluorescente que se une al ADN para teñir el núcleo.
Observe bajo un microscopio de fluorescencia para visualizar el intermediario de ARNdc viral marcado dentro de la célula infectada.
Para inmunocitoquímica, retire el medio de los pocillos de la placa de 12 pocillos y agregue un mililitro de metanol a cada pocillo. D
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos