Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 4:33 min. • September 30th, 2026
Tome una placa de múltiples pocillos que contenga monocapas de células epiteliales y agregue una suspensión viral a los pocillos.
Incube con agitación ocasional para distribuir uniformemente los virus. Los virus se adhieren a las células y entran en ellas.
En un pocillo, agregue agarosa fundida, que se solidifica en una capa semisólida.
En otro pocillo, agregue una cobertura líquida viscosa a base de celulosa microcristalina e incube. Su viscosidad restringe la difusión viral, de manera similar a la cobertura semisólida.
Dentro de la célula, el virus libera su genoma y produce nuevos ARN y proteínas virales.
Los nuevos virus se ensamblan, salen de las células y provocan la lisis celular.
Los virus liberados infectan células cercanas, formando placas.
Aspire el sobrenadante líquido y agregue un fijador para preservar las células no lisadas.
Deseche el fijador y retire la cubierta de agarosa.
Añada un colorante que tiña las células viables, dejando las placas sin teñir. Luego, lave el exceso de colorante.
El recubrimiento líquido produce un número comparable de placas al del recubrimiento semisólido, lo que respalda su uso como alternativa en los ensayos de placas.
Al día siguiente de sembrar,
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