Name: El uso de un sistema de suspensión de peso para la isquemia del hígado en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-08-07T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 53 s
Description: Aprende a inducir isquemia hepática en ratones mediante un sistema de suspensión de peso que ocluye la tríada portal sin dañar el tejido. Este método permite controlar con precisión el tiempo de isquemia y estudiar la lesión por reperfusión.

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En el presente estudio fueron apoyadas por los Estados Unidos Institutos Nacionales de Salud de subvención R01-HL092188, R01-DK083385 y R01HL098294, y la Fundación para la Educación e Investigación de Anestesia (FAER) otorga a HKE y DFG (Deutsche Forschungsgemeinschaft) Becas de Investigación (GR2121/1- 1) y la Asociación Americana del Corazón Grant AG.

Observaciones generales. Todas las operaciones deben llevarse a cabo bajo un microscopio vertical de disección (Leica) y utilizando un coagulador quirúrgico. Los ratones en los grupos experimentales y de simulación debe ser equiparado en edad y peso para asegurar la comparabilidad de los resultados. La administración de la temperatura, la presión arterial, la anestesia y el líquido debe ser estable y controlado durante todo el experimento. 1. Anestesia y Cirugía <ol><li> Ratones C57BL / 6 debe estar dentro de un rango de edad de 10 a 16 semanas y debe ser acompañado de género en los grupos respectivos. </li><li> Anestesie ratones con pentobarbital sódico (70 mg / kg de peso corporal ip) y mantener la anestesia con aprox. 10 mg / kg / h pentobarbital sódico. La sobredosis puede reducir significativamente la presión arterial y por lo tanto puede alterar los resultados. </li><li> Los ratones, colóquelas sobre una mesa calentada a temperatura controlada (temperatura ambiente, Effenberg, Munich, Alemania) con un termómetro rectal, unida a una reacción térmicacontrolador para mantener la temperatura corporal a 37 º C. </li><li> Los ratones y colóquelos en una posición supina sobre la mesa de cirugía, con las extremidades superiores e inferiores unidas a la mesa con cinta extraíble. </li><li> En el caso de los experimentos de supervivencia de técnicas adecuadas de asepsia, incluyendo el recorte de cabello, la desinfección de la piel con los yodóforos (Betadine, por ejemplo), la manipulación estéril de instrumentos esterilizados en autoclave, y usando máscaras de unos guantes estériles para el cirujano son obligatorios. </li></ol> 2. La oclusión de la tríada portal <ol><li> Cubra el área de la incisión con aceite mineral para evitar la inhalación de pelo de ratón por el corte de la piel y previniendo así el riesgo de alergias del pelo del ratón. Realizar laparotomía media y la incisión de la línea alba hasta el extremo superior de modo que usted puede exponer el hígado. Si es posible realizar la incisión con un electrodo de coagulación (Erbe, ICC50, Tuebingen, Alemania) para prevenir el sangrado. </li><li> Coloque la tabla de calefacción con el ratón en una posición que la cola es de direcciónTed para el cirujano. Esa posición te ofrece la mejor configuración para la localización de la tríada y colocar la sutura. </li><li> Desplazar el intestino en el lado derecho utilizando un hisopo de algodón húmedo para exponer la punta de la tríada portal. </li><li> Un poco cambiar el lóbulo medio e izquierdo hacia el diafragma y el lóbulo derecho hacia el intestino. Eso le dará una visión clara de la tríada portal por encima de la bifurcación de la derecha, mediana / izquierda lóbulos. </li><li> Inspeccione cuidadosamente la tríada portal y sostenga el lóbulo derecho suavemente con unas pinzas suaves. Eso le dará una bonita vista de la tríada portal de la izquierda. </li><li> Una vez identificado visualmente a colocar la aguja con el hilo de sutura (sutura de 7/0 nylon; Ethicon, Norderstedt, Alemania) a través de un soporte de la aguja en el lado izquierdo tríada portal, incluyendo la arteria hepática, la vena hepática, y el conducto biliar de la izquierda a la derecha del ratón. </li><li> La puntada tiene que estar estrechamente con la tríada. Un punto más profundo puede lesionar la vena vaca inferior que se encuentra bajola tríada. Por lo tanto mantener los lóbulos hepáticos derecho hacia abajo con las pinzas para identificar la vena cava antes de colocar la puntada. </li><li> Tome la punta de la aguja en el lado derecho con una pinza y tire suavemente de la zona del hígado, sin lesionar el hígado. </li><li> Adjunte a cada extremo de la sutura un tubo Eppendorf (aproximadamente 3 g, llena de agua) y colocar ambos extremos de sutura sobre los titulares de sutura. Coloque el soporte de sutura distal de la puntada para que la sutura no interfiere con la tríada derecha. </li><li> Mediante la aplicación de las ponderaciones de la tríada será inmediatamente obstruida, provocando la interrupción del suministro de sangre a los lóbulos izquierdo y la mediana del hígado. El éxito de la oclusión puede ser fácilmente confirmado por la inspección visual de la palidez pálido de los lóbulos isquémicos. En contraste, el cambio de color desaparece inmediatamente cuando los pesos colgantes son liberados de los polos y el hígado se reperfundido. Este modelo de isquemia parcial hepática mesentérica evita la congestión mediante la preservación de Blood flujo de los lóbulos hepáticos derecho. </li><li> Vuelva a colocar el intestino en la cavidad abdominal. Mantener el hígado y el intestino tibia con una esponja húmeda empapada con agua a 37.0 ° C. Además de mantener una temperatura corporal estable de cubrir los ratones con una envoltura de los alimentos disponibles en el mercado después de terminar la cirugía. </li><li> Realizar la isquemia como se requiere según el protocolo experimental. Después de un comunicado de la isquemia de tiempo definido los pesos y la reperfusión de los lóbulos del hígado la mediana y la izquierda se iniciará inmediatamente. Esta técnica permite la producción de isquemia reversible en ratones. Si no hay tiempos de isquemia más se llevará a cabo retirar con cuidado el hilo de sutura. </li><li> Añadir aproximadamente 400 l de cloruro sódico en la cavidad abdominal 15 minutos antes y directamente después de la reperfusión. Continuar para sustituir el líquido cada 30 minutos en una cantidad de 100 l para compensar la pérdida de fluido durante el tiempo de reperfusión. </li><li> Para los experimentos de supervivencia de la herida quirúrgica se cierra con sutura continua de la pared muscular y wi pielª una sutura 4/0. </li></ol> 3. Los cambios en la perfusión del hígado Los parámetros de resultados se recomienda lo siguiente para determinar isquemia hepática daño hepático siguiente: Determinar las enzimas hepáticas (por ejemplo, ALT, AST) y la histología hepática (tinción H &amp; E) isquemia hepática siguiente y reperfusión 3,9. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/2550/2550fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1 Modelo de un sistema de suspensión-el peso de la isquemia hepática. Un sistema de peso que cuelga se ha establecido para inducir isquemia hepática del lóbulo izquierdo y la mediana de tres. (A) Por lo tanto el lóbulo caudado y el derecho se separaron suavemente del lóbulo izquierdo. El lóbulo derecho estaba ligeramente desplazado a continuación para ver con claridad la tríada portal encima de la bifurcación de los lóbulos derecho e izquierdo, la mediana. Una sutura de nylon 8,0 se colocó bajo la tríada hepática izquierda. (B) al final de cada sutura un peso pequeño (3 g Eppendorf tuBES llenos de agua) se adjunta y aplicada. Isquemia hepática es visible por un cambio de color del lóbulo izquierdo y la mediana de rojo a amarillo pálido. Este diseño experimental permite la oclusión precisa y reperfusión de la tríada hepática izquierda por la aplicación y liberación de la carga de peso. <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/2550/2550fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. Efecto de diferentes tiempos de isquemia en el hígado alanina (ALT) y aspartato (AST) aminotransferasa en ratones. Parcial portal de la isquemia se indujo la tríada como se indica (0 - 60 min de isquemia). Después de 2 h de la reperfusión, ALT (A) y AST (B) se midieron. Los resultados se expresan como media ± SE de 6 a 7 ratones / grupo. * P &lt;0,05 en comparación con isquemia min 0 (control simulado).

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<li>Beraza, N., Ludde, T., Assmus, U., Roskams, T., Vander Borght, S., Trautwein, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatocyte-specific+IKK+gamma%2FNEMO+expression+determines+the+degree+of+liver+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Hepatocyte-specific IKK gamma/NEMO expression determines the degree of liver injury.</a> Gastroenterology. 132, 2504-2517 (2007).</li>
<li>Lentsch, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+and+function+of+hepatocyte+NF-kappaB+in+postischemic+liver+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Activation and function of hepatocyte NF-kappaB in postischemic liver injury.</a> Hepatology. 42, 216-218 (2005).</li>
<li>Luedde, T., Assmus, U., Wustefeld, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deletion+of+IKK2+in+hepatocytes+does+not+sensitize+these+cells+to+TNF-induced+apoptosis+but+protects+from+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Deletion of IKK2 in hepatocytes does not sensitize these cells to TNF-induced apoptosis but protects from ischemia/reperfusion injury.</a> J. Clin. Invest. 115, 849-859 (2005).</li>
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</ol>

No hay conflictos de interés declarado.

El presente estudio describe una técnica de realización de la isquemia en un modelo murino utilizando un sistema de suspensión de peso para la oclusión de la tríada portal hepático izquierdo. Aunque es un método fácil de aprender las trampas siguientes deben ser tenidas en cuenta. Un error muy común al principio es un punto de profundidad que incluye la tríada portal y la vena cava. La tasa de respiración y el corazón se ralentizará un plazo de 15 minutos debido a la mayor resistencia y la disminución de devolver la sangre al corazón que resulta en una temprana muerte de los ratones. La mejor manera de prevenir la introducción de asignaturas de la vena cava es localizar la vena cava antes de la puntada a la celebración de los lóbulos derecho hacia abajo con unas pinzas. Otra cuestión importante es que los pesos no son de pesado que puede dar lugar a demasiada tensión en el juicio portal de izquierda y derecha que también detiene el flujo sanguíneo en los lóbulos derecho. Por lo tanto la cantidad de agua en los viales de Eppendorf debe ajustarse al peso del ratón y la stitulares UTURO debe colocarse distalmente desde la ubicación de puntada. Por el contrario, si los pesos son de la presión arterial no se haya detenido por completo. Ambos errores son fácilmente detectables por un cambio de color pálido, adicional a la del lóbulo derecho o el cambio de color insuficiente de los lóbulos medios e izquierdo, respectivamente. Por lo tanto el cambio de color hepática tras la aplicación de los pesos debe ser controlada cada 10 minutos. Otra complicación quirúrgica común es las heridas sufridas por el hígado con la aguja. Por lo tanto los lóbulos derecho debe ser mantenido con un fórceps suaves de modo que la punta de la aguja puede ser fácilmente visto y tomada con un soporte de aguja. Si estas trampas en el comienzo se tienen en cuenta el sistema de suspensión de peso para la isquemia hepática proporciona una lesión altamente reproducibles debido a la isquemia, reduciendo al mínimo la variabilidad de daño hepático asociado con sujeción de la tríada portal. Mediante el uso de un sistema de suspensión de peso, la tríada portal es manipula solamente una vez en toda laprocedimiento quirúrgico, causando daños significativamente menor a los lóbulos hepáticos. Además, ninguna de congestión hepática o intestinal se produce con esta técnica. Más traumatismo de los tejidos se produce mediante la eliminación y la sustitución de las abrazaderas de los buques, sobre todo con una nueva aplicación de la pinza durante los ciclos de isquemia múltiples, como en el precondicionamiento isquémico. El uso de colgar pesos que esté en un lugar alejado del tejido hepático, de acuerdo con nuestras observaciones, proporciona la ventaja de oclusión fiable al tiempo que evita el trauma del tejido debido a la manipulación de los lóbulos del hígado de la reaplicación de una abrazadera. En conjunto, el presente estudio proporciona la viabilidad del sistema de suspensión-el peso de la oclusión de la tríada portal durante la isquemia, reduciendo al mínimo la variabilidad y las limitaciones asociadas con la sujeción. Así, esta técnica podría ser de interés para otros investigadores que consideran que el estudio de la isquemia hepática.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nombre del reactivo </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentarios </td></tr><tr><td> El pentobarbital sódico (más grave) </td><td> Ls Vortech Farmacéutica, SA </td><td> VPL 9372 </td><td> 4 mg / ml en solución salina </td></tr><tr><td> Sutura, Prolene 8.0 </td><td> Ethicon, EE.UU. </td><td> M8739 </td><td> reutilizables </td></tr><tr><td> microscopio de disección </td><td> Leica </td><td> n / a </td><td> considerar la distancia generosa de trabajo </td></tr><tr><td> Calefacción Mesa </td><td> Rt, Effenberger, Alemania </td><td> n / a </td><td> único proveedor y una sola </td></tr><tr><td> Los instrumentos quirúrgicos </td><td> IPM, Dumont </td><td></td><td> Pinzas, porta agujas </td></tr><tr><td> Coagulador </td><td> Erbe, ICC50, Tuebingen, Alemania </td><td> n / a </td><td> Distintos proveedores de coaguladores </td></tr></tbody></table> Tabla 1. Reactivos específicos y equipos.

el uso de un sistema de suspensión de peso para la isquemia del hígado en ratones

Use of a Hanging-weight System for Liver Ischemia in Mice

Lesión hepática aguda debido a la isquemia puede ocurrir durante varios procedimientos clínicos de trasplante hepático, por ejemplo, la resección del tumor hepático o reparación de trauma y puede resultar en insuficiencia hepática que tiene una alta tasa de mortalidad 1-2. Por lo tanto los estudios murinos de isquemia hepática se han convertido en un importante campo de la investigación, proporcionando la oportunidad de utilizar los estudios farmacológicos y genéticos 3.9. En concreto, los ratones condicionales con la eliminación específica de tejido de un gen (CRE, flox sistema) proporciona una visión de la función de las proteínas en tejidos específicos 10-13. Debido a la dificultad técnica asociada con manual de sujeción de la tríada portal en ratones, se realizó una evaluación sistemática mediante un sistema de suspensión de peso para el portal de la oclusión tríada que se ha descrito previamente 3. Mediante el uso de un sistema de suspensión de peso que colocar una sutura alrededor de la rama izquierda de la tríada portal sin causar ningún daño a los lóbulos hepáticos, ya que también lamejores abrazaderas disponibles puede causar daño hepático del tejido debido a la cercanía de tejido hepático para los vasos. Además, la rama derecha de la tríada hepática todavía se perfundieron tanto, no se produce congestión intestinal con esta técnica como el flujo de sangre a los lóbulos hepáticos derecho se conserva. Por otra parte, la tríada portal es manipula solamente una vez durante todo el procedimiento quirúrgico. Como resultado, los procedimientos como pre-acondicionamiento, con tiempos cortos de isquemia y reperfusión, se pueden realizar fácilmente. La evaluación sistemática de este modelo mediante la realización de la isquemia diferente y los tiempos de reperfusión reveló una correlación estrecha del tiempo de isquemia hepática con daño hepático, medido por la alanina (ALT) y aspartato (AST), los niveles séricos de aminotransferasas 3,9. En conjunto, estos estudios confirman la lesión hepática altamente reproducible cuando se utiliza el sistema de suspensión-el peso de la isquemia y la reperfusión hepática intermitente. Así, esta técnica podría ser útil para el interés de otros investigadoresdisfunción eréctil en los estudios de isquemia del hígado en ratones. Por lo tanto el clip de vídeo ofrece un detallado paso a paso la descripción de esta técnica.

Hemos establecido un nuevo modelo murino de un sistema de peso que cuelga de la oclusión de la tríada portal. Esta técnica puede ser útil para futuras investigaciones en modelos de isquemia hepáticas de ratón.

El uso de un sistema de suspensión de peso para la isquemia del hígado en ratones

La lesión hepática aguda por isquemia puede producirse durante diversos procedimientos clínicos, p. ej., el trasplante de hígado, la resección de tumores hepáticos o la reparación de traumatismos y...

El objetivo de este procedimiento es inducir isquemia hepática para el estudio de la lesión por reperfusión. Esto se logra primero exponiendo los lóbulos del hígado. El siguiente paso consiste en exponer la tríada hepática izquierda, que incluye la vena porta, la arteria hepática y el conducto biliar.Una vez aislado, se coloca una sutura alrededor de la tríada izquierda, y se aplica un sistema de peso colgante para inducir isquemia hepática. En un momento determinado tras la isquemia, se levantan los pesos para iniciar la reperfusión. En última instancia, el grado de lesión hepática tras la isquemia y la reperfusión puede determinarse midiendo la TGO y la TGP en sangre y realizando histología hepática. La ventaja principal de esta técnica frente a métodos existentes, como el uso de pinzas para provocar isquemia hepática, es que la sutura no causa lesión en el tejido hepático y que el momento de la isquemia puede ser más preciso.La demostración visual de este método es fundamental, ya que la colocación exacta del punto de sutura es clave para obtener una isquemia hepática reproducible sin dañar el tejido. Comience por preparar el área quirúrgica con instrumentos esterilizados y todos los demás materiales necesarios para la cirugía. Para iniciar, coloque un ratón anestesiado en posición supina sobre una mesa calefaccionada con control de temperatura.Sujete las extremidades superiores e inferiores a la mesa con cinta adhesiva desmontable para facilitar la localización del triángulo y la colocación del punto de sutura. Coloque al ratón y a la mesa calefactora de manera que la cola quede orientada hacia el cirujano. A continuación, inserte una sonda rectal conectada a un controlador térmico de retroalimentación para mantener la temperatura corporal.Cubra el área de la incisión con aceite mineral para prevenir la inhalación de pelo de ratón y reducir la exposición a alérgenos. Una vez que el animal haya sido adecuadamente preparado, confirme la profundidad de la anestesia antes de realizar una laparotomía media. Continúe cortando el ligamento alba hasta que el hígado pueda exponerse fácilmente.A continuación, use un hisopo de algodón húmedo para desplazar los intestinos y exponer la tríada portal. Para obtener una mejor vista, desplace el lóbulo medio y el izquierdo hacia el diafragma y el lóbulo derecho hacia el intestino. Utilice pinzas suaves para sujetar el lóbulo derecho y obtener una vista clara de la rama portal izquierda.Tríada y vena cava inferior. Pase con cuidado una sutura alrededor de la tríada portal izquierda. Esta incluye la arteria hepática, la vena hepática y el conducto biliar.Use pinzas para agarrar la punta de la aguja desde el lado derecho y pase suavemente la sutura sin dañar el hígado. La puntada debe colocarse justo debajo de la tríada; si es más profunda, podría lesionar la vena cava inferior. Una vez colocada la sutura, sujete un tubo con peso en cada extremo.Cuando estén listos, estos pesos se colocarán sobre los sujetadores de sutura que se encuentran distalmente respecto a la puntada. Como se observa aquí, para inducir la isquemia, desplace ambos pesos sobre los sujetadores de sutura. La tríada quedará ocluida inmediatamente, provocando una interrupción del suministro sanguíneo a los lóbulos izquierdo y medio del hígado.La oclusión exitosa se confirma por el blanqueo pálido de los lóbulos hepáticos medio e izquierdo. Este modelo de isquemia hepática parcial evita la congestión mesentérica al mantener el flujo sanguíneo hacia los lóbulos hepáticos derechos. Cuando finalice el período isquémico predeterminado, levante los pesos para aliviar la tensión sobre la sutura.Debe observarse un cambio de color al reperfundir el hígado. Devuelva el intestino a la cavidad abdominal y mantenga el hígado y el intestino calientes con un hisopo húmedo empapado en agua tibia. Después del período de reperfusión, se puede recoger sangre y tejido hepático para evaluar el grado de daño hepático tras la isquemia hepática.El grado de lesión hepática puede determinarse tiñendo el tejido con hematoxilina y eosina. El tejido sano que se observa aquí presenta menos hepatocitos, necrosis y hinchazón en comparación con el hígado isquémico. Las enzimas hepáticas, alanina aminotransferasa ALT y aspartato aminotransferasa AST, son marcadores comunes del daño hepático en este caso.Los niveles de una LT y una ST-A aumentaron cuando se incrementó el período de isquemia. Un maestro. Esta técnica puede realizarse en menos de 10 minutos si se realiza correctamente.Otros métodos como la precondición isquémica pueden realizarse para responder preguntas adicionales respecto al daño hepático debido a la isquemia.

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Un modelo murino de isquemia miocárdica y el precondicionamiento isquémico es una herramienta importante para estudiar los mecanismos...

El uso de un sistema de peso que cuelga de la oclusión coronaria en ratones

Un modelo murino precisa para la lesión renal aguda (IRA), debido a la isquemia es una herramienta importante para investigar la lesión renal aguda y, posiblemente, encontrar herramientas terapéuticas para tratar la lesión renal. El sistema de peso que cuelga ofrece una herramienta para la oclusión de la arteria renal inmediata y confiable y la reperfusión, sin causar congestión renal.

El uso de un sistema de suspensión de peso para la oclusión de la arteria renal aislada

El trauma quirúrgico induce una respuesta inflamatoria. Las citocinas y los ligandos endógenos se sabe que modulan el tamaño del infarto de miocardio después de la isquemia y la reperfusión. Se presenta una versión modificada de tórax cerrado, el modelo murino de isquemia y reperfusión con pesas colgantes para minimizar los efectos de la toracotomía.

Un murino tórax cerrado modelo de isquemia y reperfusión miocárdica

Esta película muestra cómo adquirir la hemodinámica sistémica y hepática en los ratones. Todo el monitoreo incluye la adquisición de los parámetros vitales, presión arterial sistémica, la presión venosa central, tasa de flujo de la arteria hepática común, y la presión de la vena porta, así como la velocidad de flujo portal en ratones.

Monitoreo de Parámetros sistémicos y hemodinámicos hepática en ratones

Aquí se describe un procedimiento quirúrgico que muestra cómo lograr la ligadura permanente de la arteria coronaria descendente izquierda-anterior en ratones. Este modelo es de gran relevancia para investigar la fisiopatología del infarto de miocardio y los procesos biológicos concomitantes.

Modelo de infarto de miocardio murino usando ligadura permanente de la arteria coronaria descendente anterior izquierda

Describimos en detalle un modelo de tumor de metástasis hepáticas de cáncer colorrectal clínicamente relevante (CRLM) y la influencia de la reperfusión de isquemia hepática (I/R) en el crecimiento tumoral y la metástasis. Este modelo puede ayudar a entender mejor los mecanismos subyacentes promoción inducida por cirugía del crecimiento metastásico hepático.

Modelo murino de tumores hepáticos metastásicos en el escenario de la lesión por reperfusión de isquemia

El protocolo describe un método sencillo de resección de un hígado de ratón intacto para estudios metabólicos a través de la perfusión de la vena porta.

Ex Vivo Perfusión hepática a través de la vena porta en el ratón

Se creó un sistema normotérmico de perfusión hepática ex vivo (NEVLP) para hígados de ratón. Este sistema requiere experiencia en microcirugía, pero permite resultados de perfusión reproducibles. La capacidad de utilizar hígados de ratón facilita la investigación de vías moleculares para identificar nuevos aditivos de perfusión y permite la ejecución de experimentos centrados en la reparación de órganos.

Normothermic ex vivo liver machine perfusión en ratón

Se ha demostrado que la asociación de la partición hepática y la ligadura de la vena porta para la hepatectomía por etapas (ALPPS) da lugar a una regeneración hepática notable después de varias semanas después de la cirugía de primera etapa. Se han desarrollado modelos animales que se han sometido a ALPPS para explorar la posible capacidad de regeneración hepática y lograr resultados clínicos favorables.

Un modelo de ratón de la partición hepática asociada y la ligadura de la vena porta para el procedimiento de hepatectomía por etapas con ayuda de microscopía

Este protocolo proporciona información técnica para la reconstrucción de vasos mediante la técnica del manguito en el trasplante hepático ortotópico de ratón.

Reconstrucción vascular con la técnica del manguito en el trasplante hepático ortotópico de ratón

El modelo murino de hepatectomía parcial 2/3 (66%) está bien descrito en la literatura, pero rara vez se han utilizado hepatectomías más extendidas que imitan el síndrome de tamaño pequeño después del trasplante hepático. Describimos un procedimiento de hepatectomía extendida del 78% en un modelo de ratón que resulta en aproximadamente un 50% de letalidad postoperatoria en ratones sanos.

Hepatectomía extendida al 78% en un modelo quirúrgico de ratón

Aprende a inducir isquemia hepática en ratones mediante un sistema de suspensión de peso que ocluye la tríada portal sin dañar el tejido. Este método permite controlar con precisión el tiempo de isquemia y estudiar la lesión por reperfusión.

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