JoVE Encyclopedia of Experiments
Investigación sobre el cáncer
0 vistas • 3:23 min • April 30th, 2023
Para comenzar, prepare una coneja anestesiada en posición dorsal. Hacer una incisión quirúrgica a través de su pared abdominal para exponer la cavidad abdominal. Localiza los cuernos uterinos. Estas estructuras tubulares son análogas a dos úteros distintos que se extienden desde las trompas de Falopio y se abren en dos cuellos uterinos separados a ambos lados. Ate quirúrgicamente los cuernos uterinos a ambos lados en un sitio más cercano a los cuellos uterinos para aislar las regiones distales del cuerno uterino.
Ahora, inyecte una suspensión de células tumorales deseadas altamente metastásica en el miometrio o la capa muscular externa del útero en un punto entre el sitio de sutura y el cuello uterino. Vuelva a colocar los cuernos uterinos en el abdomen. Cierra la incisión y deja que el conejo se recupere. A los pocos días de la inyección, se desarrolla un tumor en el lugar de la inyección. Las células de este tumor, con alto potencial metastásico, pueden viajar a través del sistema linfático y extravasarse a los ganglios linfáticos, lo que resulta en metástasis en los ganglios linfáticos.
Use una hoja de bisturí número 11 para hacer una incisión de 2,5 centímetros, 1 centímetro craneal a la sínfisis del pubis a través de la piel y el tejido subcutáneo. Haga una incisión en la fascia del recto y diseccione los músculos rectos lateralmente para exponer el peritoneo subyacente. Confirme que la superficie inferior esté libre de intestinos u otros órganos abdominales. Ingrese bruscamente al peritoneo para identificar la vejiga urinaria y pase un dedo enguantado superior, posterior y lateralmente sobre el vértice de la vejiga para ubicar los cuernos uterinos.
Extraer los cuernos uterinos a través de la incisión abdominal para apoyarlos en la pared abdominal. Use una sutura absorbible trenzada 3-0 para realizar una sola ligadura de sutura de cada cuerno uterino, aproximadamente de 1,5 a 2 centímetros distal a los cuellos uterinos y justo medial a las arterias uterinas. Luego, ate las suturas cómodamente para ocluir los cuernos uterinos distales.
Para inocular el miometrio con la suspensión de células VX2 previamente preparada, cargue una jeringa de 1 mililitro equipada con una aguja de calibre 27 con 1 mililitro de células. Inyecte lentamente 0,5 mililitros de la suspensión celular durante 1 minuto en cada cuerno uterino proximal al sitio de sutura entre la sutura y el cuello uterino. Luego, aplique presión en el sitio de inyección de miometrio durante 30 segundos para minimizar la fuga de células. Inspeccione los sitios de inyección y sutura para detectar hemostasia antes de volver a colocar los cuernos uterinos en el abdomen.