Aislamiento de células mesoteliales: una técnica para aislar células mesoteliales primarias de muestras de tejido de epiplón humano

Las células mesoteliales primarias humanas, o HPMC, recubren muchos órganos viscerales como el epiplón o la capa de tejido graso presente en la cavidad peritoneal.

Para aislar las células mesoteliales, comience sumergiendo una muestra de epiplón humano en un tampón adecuado para eliminar el exceso de glóbulos rojos o glóbulos rojos. A continuación, coloque el epiplón en un plato de vidrio y píquelo en trozos. Esto disocia el tejido, liberando HPMC junto con los glóbulos rojos contaminantes.

Transfiera las piezas a un tubo cónico y déjelas quietas durante el tiempo deseado. El tejido picado rico en grasa de baja densidad sube a la parte superior, mientras que los componentes celulares densos se asientan en la parte inferior. A continuación, aspire el líquido en la parte inferior, que contiene HPMC y glóbulos rojos, en un tubo nuevo.

Centrifugar para recolectar las células. Retire el sobrenadante que contiene tampón. Vuelva a suspender el gránulo en un medio de crecimiento mesotelial e incube durante el tiempo deseado. El medio facilita el crecimiento selectivo de HPMC sobre RBC.

Observe las células con un microscopio óptico para confirmar el crecimiento de células mesoteliales human