Inyección intraperitoneal de células: un método de administración de células cancerosas en el tejido adiposo peritoneal de un modelo murino

La cavidad peritoneal es el espacio entre la pared abdominal y el revestimiento de los órganos internos. Para la inyección intraperitoneal, comience sujetando a un ratón vivo por la región del cuello de modo que la cabeza del ratón se incline hacia abajo con su abdomen ventral expuesto.

Sujetar al ratón restringe su movimiento y desplaza los órganos abdominales hacia el diafragma, evitando daños accidentales a los órganos durante la inserción de la aguja.

Adyacente a la línea media a través del abdomen del ratón, en el cuadrante inferior derecho, ubique un punto para la inserción de la aguja. Este sitio evita el riesgo de perforar el ciego.

A continuación, tome una jeringa que contenga una suspensión unicelular de células de cáncer de ovario. Inserte la aguja en el punto elegido a una profundidad de aproximadamente medio centímetro para penetrar solo en la pared abdominal externa. Finalmente, inyecte la suspensión de células cancerosas lentamente. Esto asegura una distribución eficiente de las células dentro de la cavidad peritoneal.

Regrese al ratón a su jaula y vigílelo para detectar el crecimiento del tumor. Los tejidos dentro de la cavidad peritoneal pueden liberar moléculas quimiotácticas específicas que atraen a las células cancerosas y conducen a su migración y colonización, lo que eventualmente contribuye al desarrollo del tumor.

Cargue 500 microlitros de la suspensión unicelular etiquetada con fluorescencia en la jeringa. Luego, coloque la jeringa en una aguja estéril de calibre 25 con tapa para reducir el cizallamiento celular antes de la inyección. Sujetando el ratón con la otra mano, levántalo por el pescuezo y sujeta la cola con la palma y el índice. Luego, fije la pata trasera izquierda entre el dedo anular y el meñique. Para evitar traumatizar los órganos abdominales, sujete bien al ratón para que no pueda moverse durante la inyección.

Imagine una línea a través del abdomen y ubique un punto en el lado derecho del animal y cerca de la línea media. El punto de entrada es craneal y ligeramente medial del último pezón. Prepárese para insertar la aguja en el lado derecho del ratón para evitar el ciego y reducir el riesgo de perforar los intestinos. Inserte la aguja en la región lateral inferior del abdomen del ratón a una profundidad de aproximadamente 0,5 centímetros. Tire hacia atrás del émbolo para confirmar que la aguja no ha penetrado en un vaso sanguíneo u otros órganos peritoneales.

Si no se aspira líquido, inyecte la muestra con una presión lenta y constante. Luego, retire la aguja y devuelva al ratón a su jaula. No vuelva a tapar la jeringa antes de desecharla en el recipiente para objetos punzantes.