Modelado de cáncer basado en membrana corioalantoidea de pollo: un modelo in ovo para estudiar la tumorigénesis y la metástasis de las células cancerosas

La membrana corioalantoidea del pollo, o CAM, es una membrana altamente vascularizada que se encuentra en los huevos de ciertos vertebrados como los pollos. Esta membrana extraembrionaria recubre una membrana de cubierta no vascular y funciona como el sitio de intercambio de oxígeno gaseoso y dióxido de carbono entre el embrión y el medio ambiente.

Para generar un modelo de cáncer CAM, comience con un huevo de gallina fertilizado viable que lleve un CAM completamente desarrollado con una cáscara parcialmente abierta que exponga su vasculatura ramificada. Confirme que el CAM esté separado de la membrana de la carcasa.

Coloque un anillo antiadherente estéril sobre el punto de ramificación de un vaso sanguíneo. Con una varilla de vidrio, frote suavemente la membrana dentro del anillo para raspar su capa epitelial externa y exponer la capa mesodérmica subyacente que lleva la vasculatura. Pipetea una suspensión fría de células cancerosas mezcladas con una matriz extracelular adecuada en el anillo. El anillo restringe la dispersión celular.

Deje que la matriz se solidifique para asegurar las células en su interior. Selle la abertura de la cáscara del huevo e incube el huevo en condicione