Ensayo de espín de agarosa: una técnica para incrustar organoides para el análisis histológico

Los

cultivos de organoides 3D de células cancerosas recapitulan muchas características fisiopatológicas de los cánceres humanos. Por lo tanto, estos cultivos in vitro forman un excelente modelo para la investigación del cáncer.

Para procesar estos organoides, comience con un cultivo de organoides 3D preformados cultivados en una matriz de membrana basal adecuada. Agregue un medio de recuperación celular deseado e incube. El medio facilita la despolimerización del gel de matriz, liberando los organoides 3D en la solución.

Centrifuga esta mezcla para peletizar los organoides. El medio de recuperación que contiene los componentes de la matriz permanece en el sobrenadante. Deseche el sobrenadante. A continuación, agregue una solución de paraformaldehído al gránulo de organoide. El químico ingresa a las células organoides y se une a los aminoácidos, lo que provoca la reticulación de proteínas y la fijación de muestras. Este paso es vital para cualquier aplicación histológica posterior.

Peletice los organoides para separar y eliminar el sobrenadante que contiene paraformaldehído. Agregue agarosa derretida tibia a los organoides. Use una aguja para separar y dispersar los organoides granu