Ensayo de organoides prostáticos: una técnica de cultivo ex vivo basada en anillos de gel de matriz para estudiar la capacidad de diferenciación de las células epiteliales de la próstata

El epitelio prostático comprende principalmente células epiteliales basales y epiteliales luminales. Una monocapa de células basales forma el revestimiento externo de la glándula y apoya la supervivencia de las células luminales. Por el contrario, las células luminales recubren la luz y secretan proteínas específicas de la próstata.

Para estudiar la diferenciación epitelial prostática ex vivo, comience con una suspensión de células epiteliales basales de la próstata. Mezcle la suspensión con una matriz de membrana basal enfriada en la proporción deseada. Pipetea esta mezcla junto a la base de la pared interna de una placa de cultivo repelente de células. Gire la placa para que la mezcla forme un anillo a lo largo de la circunferencia del pozo.

Incube la placa para permitir que la matriz se solidifique. Complemente la cultura con un medio preferido. Los factores de crecimiento en el medio apoyan la proliferación de células epiteliales basales. Al mismo tiempo, la naturaleza repelente de células de la placa de cultivo evita la adhesión celular, lo que alienta a las células a formar esferoides 3D dentro de la matriz.

Con el tiempo, los esferoides desarrollan lúmenes bordeados con epit