Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 3:08 min. • April 30th, 2023
El lisado celular, o el líquido que contiene el contenido celular lisado, encuentra aplicación en procesos posteriores como extracciones y análisis de proteínas. El estudio de estas fracciones revela información sobre las características y funciones de las células.
Para preparar lisados de proteínas organoides, comience con un cultivo de organoides cultivados en una matriz de membrana basal deseada. Retire los medios de cultivo gastados del plato. Agregue medios tibios que contengan proteasas sobre la matriz. Pipetear repetidamente para desalojar la matriz del plato.
Incuba la mezcla. Las enzimas proteolíticas en el medio degradan la matriz y liberan los organoides en la solución. Centrifugar la muestra para separar los organoides del sobrenadante que contiene enzimas.
Vuelva a suspender el gránulo de organoide en un tampón de lisis de proteínas adecuado. Incubar la muestra. Los detergentes en el tampón alteran las membranas celulares de los organoides, liberando contenido intracelular en la solución. Al mismo tiempo, los inhibidores de proteínas en el tampón inactivan las enzimas proteasa y fosfatasa liberadas, evitando la degradación de sus proteínas sustrato.
Además, sonique la
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos