Muestreo de células individuales mediante microdisección por captura láser: una técnica para recolectar células objetivo de una población celular heterogénea

La microdisección por captura láser ayuda a obtener una sola célula diana a partir de una mezcla de células preparada en un portaobjetos de vidrio. Comience tomando un portaobjetos de vidrio adecuado recubierto con una membrana bioquímicamente inerte y permeable a los rayos UV en su superficie. Exponga el portaobjetos a la luz ultravioleta para que sea más hidrófilo y mejore la adherencia celular.

Ensamble el portaobjetos en un aparato de citocentrífuga. Agregue suspensión celular en el puerto del embudo del aparato. Citocentrífuga para permitir que la fuerza centrífuga se concentre y deposite una monocapa de células en un área pequeña en el portaobjetos de vidrio. Deje que la diapositiva se seque al aire.

Coloque el portaobjetos, con la muestra hacia arriba, bajo un microscopio de microdisección láser. Defina la región que rodea la celda de interés. Ahora, enfoque el rayo láser para diseccionar la región que contiene la célula diana junto con el recubrimiento de la membrana. A continuación, desenfoque el rayo láser y púlmelo para generar presión. Esta energía catapulta la región microdiseccionada hacia la tapa invertida de un tubo de recolección preensamblado que contiene un tampó