Inyección intraprostática de células cancerosas: una técnica para administrar células cancerosas para establecer un modelo ortotópico de cáncer de próstata en ratones

La inyección ortotópica intraprostática de tumores administra células tumorales que coinciden con el histotipo del tejido prostático directamente en la glándula prostática del animal receptor.

Para comenzar, prepare un ratón macho anestesiado en posición supina. Haga una incisión abdominal en la línea media y diseccione la musculatura interna para exponer la cavidad abdominal. Localice uno de los lóbulos prostáticos anteriores. Estos lóbulos prostáticos están unidos a la curvatura menor de las vesículas seminales y se encuentran cerca de la vejiga urinaria.

Ahora, inyecte una suspensión fría de células de cáncer de próstata mezcladas con la matriz de membrana basal deseada en el eje largo del lóbulo prostático anterior. Asegure la entrega completa de la suspensión celular y retraiga suavemente la aguja. Permita que la matriz se solidifique e incruste las células en su interior.

Posteriormente, coloque el lóbulo prostático junto con la vesícula seminal nuevamente en la cavidad abdominal. Sutura la incisión quirúrgica. Deje que el mouse se recupere. Revise el ratón semanalmente para observar el crecimiento de tumores ortotópicos dentro del lóbulo prostático anterior.

Después de confirmar la falta de respuesta al pellizco de los dedos de los pies, aplique ungüento en los ojos del ratón y afeite todo el pelaje del abdomen del animal. Esterilice la piel expuesta con tres rondas de exfoliación quirúrgica con almohadillas estériles no adherentes seguidas de toallitas estériles con alcohol. Cuando la piel esté seca, coloque al ratón en posición supina sobre una superficie limpia sobre una almohadilla térmica directamente debajo del objetivo de un microscopio quirúrgico limpio, y cubra al animal con un paño estéril con un pequeño orificio cortado sobre el abdomen.

Hacer una incisión de 1 centímetro en la piel externa y la musculatura abdominal interna a lo largo de la línea media del abdomen superior al pene y las glándulas prepuciales. Localizar una de las vesículas seminales bilaterales y los lóbulos prostáticos anteriores adheridos que suelen ser posteriores, laterales y ligeramente superiores a la vejiga. Pida a un asistente que mezcle la solución de células cancerosas Myc-CaP matrigel con un pipeteo suave y que aspire lentamente 30 microlitros de células en una aguja de calibre 28 conectada a una jeringa de 50 microlitros.

Luego, con pinzas de tejido Graefe, levante suavemente la punta de una vesícula seminal para crear tensión en el tejido sin perforar la vesícula, e inserte con cuidado el bisel de la aguja paralelo al eje largo del lóbulo prostático anterior. Inyecte lentamente todo el volumen de células en el lóbulo, seguido de una retracción lenta de la aguja para evitar fugas.

Una inyección exitosa será evidente por una congestión del lóbulo prostático interior. Con cuidado y de manera constante, mantenga la vesícula seminal y el lóbulo prostático inyectado fuera del ratón durante aproximadamente 30 segundos para permitir que el matrigel se solidifique parcialmente dentro del lóbulo. Use un aplicador estéril con punta de poliéster para recolectar cualquier fuga de solución celular en el abdomen para prevenir el desarrollo de tumores no ortotópicos.

Una inyección intraprostática precisa es fundamental para el desarrollo de tumores ortotópicos. Tener especial cuidado para evitar perforar la vesícula seminal, inyectar lentamente la suspensión de células cancerosas y recolectar cualquier fuga de células aumentará el éxito de este procedimiento.

Ahora, devuelva suavemente la vesícula seminal y el lóbulo inyectado al abdomen sin ejercer presión sobre el lóbulo y reemplace los tejidos externos. Con suturas de aguja de corte inverso absorbibles de vicryl 5-0, cierre la musculatura abdominal interna con puntos continuos, seguido del cierre de la piel abdominal externa con puntos interrumpidos con suturas de aguja de corte inverso no absorbibles de monofilamento de nailon 4-0.

Luego, administre analgesia postoperatoria y coloque al ratón en una jaula sin ropa de cama a la mitad sobre una almohadilla térmica con monitoreo hasta su recuperación completa.

• Prostate Cancer Model - A lab representation to study the progression & treatment of prostate cancer.
• Intraprostatic Injection - Technique of injecting medication or solution directly into the prostate.
• Matrigel - A gelatinous protein matrix used in tumor cell research.
• Orthotopic Tumor Model - Study model wherein tumor cells are implanted in their original organ.
• Seminal Vesicles - Male reproductive glands located near the prostate, integral to the injection procedure.

• Introduce Prostate Cancer Model – Biological method to examine prostate cancer (e.g., intraprostatic injection).
• Key Concepts – Involve steps like shaving, sterilizing, incising and suturing (e.g., prostate biopsy procedure video).
• Underlying Mechanisms – Seminal vesicles and anterior prostate lobes are involved (e.g., prostate cancer real images).
• Connect to Experiment – Demonstrate how injections ensure successful tumor implantation within prostate.

• What is intraprostatic injection used for in a prostate cancer model?
• How is the matrigel cancer cell solution involved in the procedure?
• Why is careful handling of seminal vesicles and prostate lobes crucial in this experiment?

• Practical Applications – Used in surgical training and cancer treatment research (e.g., prostate cancer injection).
• Industry Impact – Benefits medical industries, particularly oncology and urology (e.g., injection for prostate cancer).
• Societal Importance – Advancement in prostate cancer treatment techniques (e.g., injection prostate).
• Link to Scientific Advancements – Continuous improvement of prostate cancer models for research.