Desparafinación y rehidratación de secciones de tejido: un procedimiento de dos pasos para eliminar la cera de parafina de los portaobjetos de tejido FFPE seguido de rehidratación de tejidos
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 2:43 min. • April 30th, 2023
La técnica de inclusión en parafina fijada en formol o FFPE permite la preservación de muestras de tejido fijas, deshidratadas y aclaradas dentro de bloques de parafina para su almacenamiento a largo plazo. El FFPE conserva las proteínas y otros componentes intracelulares vitales sin comprometer la morfología del tejido.
La desparafinación, o la eliminación de la cera de parafina que rodea el tejido incrustado, es un paso crítico antes de procesar cualquier muestra de tejido FFPE para su análisis posterior. Para comenzar la desparafinación, comience con un portaobjetos de vidrio que lleve una sección de tejido FFPE de interés sin teñir que tenga un grosor apropiado.
Sumerja la sección de tejido en un baño de xileno e incube durante el tiempo deseado. El xileno, un disolvente orgánico, disuelve la cera de parafina que se ha incrustado y penetrado en el tejido. La eliminación completa de la cera de parafina expone la muestra de tejido transparente fija y deshidratada.
Después de la desparafinación, trate la muestra con etanol absoluto. El etanol desplaza y elimina cualquier rastro de xileno de la sección de tejido. Posteriormente, sumerja el tejido en concentraciones decrecientes de
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