Macrodisección de tejido tumoral FFPE: una técnica para obtener tejido tumoral específico a partir de muestras sin teñir

Para comenzar la macrodisección, tome un portaobjetos de vidrio que contenga una muestra de tejido. Además, tome un portaobjetos de referencia que contenga la misma muestra de tejido y tiña con hematoxilina y eosina para la tinción de H&E.

En las células normales, la hematoxilina imparte una tinción azul a los ácidos nucleicos, mientras que la contratinción de eosina muestra las proteínas celulares de color rosa. La coloración azul profundo del núcleo ayuda a diferenciar las células cancerosas de las células normales.

Superponga el portaobjetos teñido con H&E con el portaobjetos sin teñir para alinear las muestras de tejido. Localice la porción que contiene células tumorales en el portaobjetos teñido con H&E. Marque el área correspondiente en el portaobjetos sin teñir.

Raspe el tejido deseado del portaobjetos sin teñir. Con una punta de pipeta húmeda, recoja el tejido raspado para garantizar una fácil transferencia de la muestra de tejido. Transfiera el tejido a un tubo que contenga un tampón de lisis. Los componentes del tampón de lisis digieren el tejido, liberando los componentes de la célula.

Trate el lisado con una proteasa adecuada e incube a alta temperatura. La proteasa esc