Aislamiento de criptas intestinales: un método para aislar criptas enteras del intestino delgado de un modelo murino

0 visualizaciones • 4:37 min. • April 30th, 2023

El revestimiento intestinal está cubierto de proyecciones o vellosidades e invaginaciones o criptas. Las criptas son las glándulas intestinales que secretan principalmente enzimas digestivas.

Para aislar las criptas del intestino delgado, comience colocando un ratón anestesiado en posición supina en una tabla de disección. Con unas tijeras, diseccione el peritoneo longitudinalmente para exponer el sistema digestivo.

Localice el intestino delgado y sáquelo suavemente del cuerpo del ratón. Corta el intestino en su base. Transfiera el intestino cosechado a un plato que contenga un tampón adecuado. Cortar el intestino longitudinalmente, exponiendo la luz.

Coloque el intestino, con el lado luminal hacia arriba, en una tabla de cortar para exponer las vellosidades. Mueva un portaobjetos de vidrio en ángulo sobre la superficie intestinal para raspar las vellosidades, exponiendo todas las criptas.

Corte el intestino en trozos pequeños y transfiera los trozos a un tubo que contenga un tampón helado para garantizar un daño mínimo a las criptas.

A continuación, tratar con EDTA e incubar. El EDTA hace que todas las criptas se desprendan del revestimiento intestinal. Retire la solución gastada

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Criptas del intestino delgado