Aislamiento y cultivo de células epiteliales de lengua murina: un procedimiento para aislar y cultivar células epiteliales de lengua a partir de un modelo de ratón

La lengua constituye un epitelio escamoso estratificado y una capa subyacente de tejido conectivo denso denominada lámina propia. El epitelio está formado por células epiteliales escamosas de varias capas que proporcionan protección contra el estrés mecánico.

Para aislar las células epiteliales, comience con una lengua de ratón recién cosechada. Pica la lengua para obtener fragmentos de tejido más pequeños. A continuación, trate los fragmentos con un cóctel de digestión personalizado que contenga enzimas colagenasa, hialuronidasa y desoxirribonucleasa.

Las enzimas colagenasa e hialuronidasa digieren la matriz extracelular que mantiene unido el tejido, promoviendo la liberación de células individuales en la suspensión. La desoxirribonucleasa degrada cualquier ADN libre liberado por las células lisadas.

Agregue tampón que contenga suero a la muestra digerida para inactivar las enzimas hidrolizadoras de proteínas. Ahora, filtre la muestra a través de filtros celulares para eliminar los fragmentos de tejido no digeridos y los desechos y obtener una suspensión unicelular de células epiteliales.

Centrifugar para separar las células. Deseche el sobrenadante que contiene la mezcla de diges