Inoculación intramucosa de células cancerosas en un modelo murino: un procedimiento para establecer un modelo ortotópico de cáncer de cabeza y cuello en ratones

Durante la inoculación intramucosa ortotópica, las células tumorales que coinciden con el histotipo del tejido mucoso se administran en el tejido mucoso de un animal receptor.

Para comenzar, sujete a un ratón anestesiado por el cuello en una plataforma quirúrgica para facilitar el acceso a su boca.

Prepare una suspensión de células cancerosas altamente metastásicas en una matriz de membrana basal enfriada en una jeringa. La baja temperatura evita que la suspensión se solidifique.

Inyecte con cuidado esta suspensión en la mejilla interna o en la región bucal del ratón. La región bucal está revestida por la mucosa bucal, que está rodeada por una red de vasos sanguíneos y linfáticos.

Asegure la administración completa de la suspensión de células cancerosas y retraiga suavemente la aguja. Permita que la matriz se solidifique e incruste las células en su interior.

Deje que el mouse se recupere. A los pocos días de la inyección, se desarrolla un tumor primario en el lugar de la inyección. Eventualmente, las células de este tumor con alto potencial metastásico pueden viajar a través del sistema linfático y extravasarse a los ganglios linfáticos.

Estas células cancerosas se adaptan a su nuevo microambiente y proliferan y establecen colonias metastásicas en los ganglios linfáticos.

Inmediatamente antes de la inyección, mezcle las células en una proporción de suspensión de células tumorales de 1 a 1 a la matriz de la membrana basal en hielo. Cargue una jeringa de 0,5 mililitros equipada con una aguja de 23G con 100 microlitros de células por animal receptor. Coloque las jeringas en hielo y confirme la falta de respuesta al pellizco del dedo del pie en un ratón anestesiado.

A continuación, inserte la aguja en la región bucal derecha o izquierda a través del espacio abierto disponible a ambos lados de la boca, manteniendo la jeringa paralela a la región bucal mientras está dentro de la cavidad oral, para facilitar la inyección del volumen completo de 100 microlitros de la suspensión de la matriz de la membrana basal celular durante un período de 5 segundos. Mantenga la jeringa en su lugar durante 5 segundos adicionales para asegurarse de que se haya inyectado todo el material antes de retirar la jeringa suavemente. Los tumores se volverán muy visibles en aproximadamente una semana.