Incrustación de esferoides 3D en gotas de gel de agarosa: una técnica para preservar los esferoides para el análisis posterior
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 2:59 min. • April 30th, 2023
Los esferoides son agregados celulares esféricos tridimensionales in vitro que imitan el microambiente tumoral in vivo y ayudan a estudiar la progresión tumoral. Para preservar estos esferoides mediante la inclusión, comience tomando un tubo estéril que contenga esferoides en un tampón deseado.
Trate los esferoides con paraformaldehído. El paraformaldehído reticula las proteínas celulares, lo que resulta en la estabilización y preservación de la estructura celular. Centrifugar los esferoides y eliminar el sobrenadante que contiene paraformaldehído. Vuelva a suspender el sedimento esferoide en tampón.
A continuación, prepare la concentración deseada de solución de gel de agarosa fundida. Haga una gota de gel de agarosa en un portaobjetos de microscopio. Mantenga la corredera sobre un bloque calefactor para evitar la solidificación de la agarosa.
Con una micropipeta con una punta de orificio ancha, recoja los esferoides del tubo. Pipetea con cuidado los esferoides en el centro de la gota de gel de agarosa sin tocar el portaobjetos del microscopio. Posteriormente, incube el portaobjetos a una temperatura adecuada para permitir que la ECM se solidifique y atrape los esferoides en su in
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos