Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 5:22 min. • April 30th, 2023
Un tumor contiene una pequeña fracción de células madre conocidas como población lateral. Estas células son quimiorresistentes, lo que las hace responsables de la recaída del cáncer.
Para aislar la población lateral de células cancerosas, comience agregando Hoechst, una solución de tinte fluorescente, al vial que contiene la suspensión de células cancerosas. Dentro de las células cancerosas normales, las moléculas de Hoechst ingresan al núcleo y se unen a la región rica en A-T en el ADN, lo que lleva a una alta fluorescencia en estas células.
Por el contrario, la población lateral contiene una alta concentración de transportadores ABC, bombas de eflujo que eliminan rápidamente las moléculas de tinte de la célula. Esta salida activa de moléculas de colorante hace que la población lateral sea fluorescente a baja intensidad.
Ahora, tome otro vial de células cancerosas tratadas con Hoechst y agréguele verapamilo. Este vial actúa como control ya que Verapamil bloquea los transportadores ABC. Este paso provoca una reducción en el flujo de salida de Hoechst y retiene el tinte dentro de las células de la población lateral.
A continuación, contratiñe las células en ambos viales con yoduro d
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