Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 3:08 min. • April 30th, 2023
Para la extracción de la médula espinal, comience con un ratón sacrificado en posición prona. Rocíe etanol para evitar cualquier posible contaminación del pelaje.
Corta la línea media desde la cabeza hasta la cola y abre la piel para revelar el tejido subyacente. Examine el cráneo del ratón para localizar la unión craneocervical que conecta el cráneo con la columna cervical.
A continuación, haga una incisión en la unión craneocervical perpendicularmente para cortar la conexión entre la cabeza y el cuello. Diseccionar la columna vertebral hasta la quinta vértebra lumbar. Posteriormente, corte la columna vertebral en la quinta vértebra lumbar para cortar la conexión con los niveles vertebrales inferiores.
Ahora, gire el mouse a la posición supina. Cortar el peritoneo y la pared torácica para exponer tanto la cavidad abdominal como la torácica. Extirpar los órganos peritoneales y retroperitoneales para acceder a la columna vertebral.
Corta las costillas para separar la columna vertebral del resto del cuerpo. Por último, enjuague la médula espinal aislada con una solución salina fría para eliminar cualquier contaminante de la sangre.
Después de sacrificar al animal en una cámara de CO2, remoje el pelaje con etanol al 70% y déjelo secar. Sujete al ratón en posición prona y luego haga una incisión en la línea media que se extienda craneocaudalmente desde la parte posterior del cuello hasta la columna lumbar.
A continuación, use fórceps para elevar los colgajos dérmicos bilateralmente y exponer el tejido subcutáneo. Palpar el cráneo del ratón hasta identificar la unión craneocervical. Use tijeras en ángulo perpendicular al animal para cortar los músculos cervicales y la columna vertebral en la unión craneocervical. Luego, disecciona la columna caudalmente y usa tijeras para realizar una transección caudal completa en la quinta vértebra lumbar.
A continuación, coloque el ratón en posición supina y, después de hacer una incisión a lo largo de la línea media desde el cuello hasta el abdomen, retraiga la piel lateralmente y luego corte el peritoneo.
Cranealmente, abra la pared torácica con unas tijeras. Después de extirpar los órganos peritoneales y retroperitoneales, use fórceps y una cuchilla quirúrgica para cortar las costillas, dejando aproximadamente 5 milímetros de costillas que sobresalen de la columna vertebral. Retire la columna vertebral del resto del cuerpo y lávese dos veces con PBS frío.