Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 4:41 min. • April 30th, 2023
Los salispheres son cultivos in vitro, autoagregados, de células epiteliales derivadas de la glándula salival. Para cultivar salisferas, comience tomando el tejido de la glándula salival humana en una placa de cultivo.
Con unas tijeras, pica el tejido en trozos finos. A continuación, complemente estas piezas con una solución de disociación que contenga enzimas colagenasa y dispasa e incube. Estas enzimas digieren la matriz extracelular presente en el tejido.
Además, triture para homogeneizar el tejido. Este paso libera las células epiteliales y los glóbulos rojos en la solución. A continuación, use un colador celular y filtre el homogeneizado de tejido en un tubo cónico nuevo para eliminar los trozos de tejido no digeridos y los desechos. Centrifugar para peletizar las células.
Después de la centrifugación, deseche el sobrenadante y vuelva a suspender el sedimento celular en el tampón de lisis de glóbulos rojos. Este tampón rompe los glóbulos rojos presentes en la suspensión celular.
Ahora, centrifugar para peletizar las células epiteliales. Vuelva a suspender el gránulo en un medio de crecimiento de células epiteliales apropiado. Además, prepare la placa de cultivo de salisphere r
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