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Investigación sobre el cáncer
0 vistas • 3:24 min • April 30th, 2023
En la enfermedad leptomeníngea, las células cancerosas de otros órganos del cuerpo hacen metástasis al líquido cefalorraquídeo o LCR contenido dentro de las leptomeninges, capas delgadas de tejido que rodean el cerebro.
La inyección intracerebroventricular facilita la administración directa del fármaco en el LCR, evadiendo la barrera hematoencefálica.
Para comenzar, prepare un ratón anestesiado en posición prona.
Haz una incisión en la cabeza para revelar el cráneo. Localice el bregma, el punto de unión de las suturas coronales y sagitales.
Con un microtaladro, taladre un orificio en el cráneo a una distancia adecuada del bregma para acceder a la capa meníngea más externa de tejido conectivo denso: la duramadre.
Luego, inserte suavemente el ommaya, un pequeño puerto de inyección, en el orificio.
Una vez hecho esto, sutura la piel circundante y deja que la ommaya se adhiera durante una duración óptima.
A continuación, conecte la jeringa llena de la suspensión del medicamento deseada a la ommaya.
Después de establecer un caudal adecuado, inyecte la suspensión del medicamento en la duramadre.
El ommaya proporciona una vía estéril para la administración directa del fármaco en el LCR en los ventrículos cerebrales del cerebro.
Ahora, desconecte la jeringa y deje la ommaya intacta en el cráneo para su posterior dosificación.
Deje que el mouse se recupere.
Con el tiempo, las moléculas del fármaco migran hacia el sitio del cáncer y evitan el crecimiento y la proliferación de células cancerosas.
Ensamble el dispositivo de inyección Murine Ommaya usando un puerto de inyección en miniatura de 25G y un disco espaciador de 1 milímetro.
Utilice un adhesivo estéril de cianoacrilato para asegurar la penetración de aproximadamente 2,5 milímetros de la cánula metálica en el hemisferio cerebral derecho y prepare la piel según la técnica estéril.
Haga una pequeña incisión en la piel, seguida de una disección roma de los tejidos subcutáneos subyacentes para exponer el cráneo. Seca el cráneo con varillas aplicadoras con punta de algodón empapadas en peróxido de hidrógeno.
Taladre un orificio de 0,9 milímetros en el cráneo, 0,5 milímetros posterior y 1,1 milímetros lateral del bregma, para exponer la duramadre.
Mueva el microtaladro a un lado y marque suavemente el hueso que rodea inmediatamente el orificio de la rebaba. Coloque un puerto de inyección en el cráneo con un adhesivo estéril de cianoacrilato e insértelo a una profundidad de aproximadamente 2,5 milímetros.
Sutura la incisión con suturas de nailon no absorbibles 4-0 en un patrón de puntada interrumpida o sutura de cordón de bolsa. Aloje a los ratones postoperatorios en jaulas individuales para su recuperación.
Para dosificar el ratón, acceda al Murine Ommaya utilizando un adaptador de inyección de puerto y una jeringa Hamilton. Con unas pinzas, sujete la parte superior del puerto de inyección en miniatura e inserte suavemente el adaptador del inyector de puerto completamente en el tabique del puerto.
Una vez realizada la inyección, separe el Murine Ommaya del adaptador de inyección de puerto con fórceps.