Ensayo basado en bioluminiscencia celular: un método de alto rendimiento para el cribado combinatorio de fármacos
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 3:17 min. • April 30th, 2023
La bioluminiscencia celular es un enfoque rápido y altamente sensible para la detección a gran escala de medicamentos contra el cáncer.
Esta técnica utiliza células tumorales que expresan luciferasa, una enzima que cataliza una reacción química productora de luz, lo que hace que las células huésped brillen en la oscuridad. La intensidad de la luminiscencia emitida es directamente proporcional a la densidad de células vivas.
Para comenzar, siembra las células que expresan luciferasa en una placa de cultivo ópticamente transparente recubierta con una matriz extracelular o ECM e incuba.
Durante la incubación, la ECM promueve la unión de las células al cultivo bien.
A continuación, tome existencias concentradas de la combinación de fármacos y agregue diferentes volúmenes de medios de cultivo para preparar la dilución en serie de la mezcla de fármacos.
Ahora, retire el medio de cultivo de las células adheridas. Agregue diferentes diluciones de la combinación de medicamentos e incube.
Durante la incubación, la combinación de fármacos actúa sinérgicamente sobre las dianas celulares.
Ahora, retire el medio que contiene el medicamento y agregue un medio nuevo que contenga luciferina.
La luc
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