Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 3:55 min. • April 30th, 2023
Para aislar los núcleos, comience tomando una muestra fresca de glioma congelado, un tumor que se origina en las células gliales del cerebro, en una placa de Petri.
Coloque la placa de Petri sobre hielo para evitar la degradación del tejido.
A continuación, pica la muestra de tejido en trozos pequeños.
Agregue un tampón de lisis preenfriado a los trozos de tejido picados. Transfiera la mezcla a un homogeneizador Dounce. Usando el mortero, homogeneizar el tejido para desintegrar las células e iniciar la lisis.
Ahora, transfiera el homogeneizado a un tubo de microcentrífuga que contenga un tampón de lisis nuevo.
Altere mecánicamente el homogeneizado con una punta de pipeta de gran diámetro. Este paso facilita la liberación de orgánulos citoplasmáticos de las células.
Posteriormente, utilizando un colador celular del tamaño adecuado, filtre el homogeneizado en un tubo nuevo para eliminar los restos de tejido y otros contaminantes.
Después de la filtración, tome el filtrado que contiene varios orgánulos celulares.
Centrifuga el filtrado a baja velocidad para granular los núcleos más densos en la parte inferior mientras los otros orgánulos celulares permanecen en el sobrenadante.
Desech
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