Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 3:05 min. • April 30th, 2023
En respuesta a ciertos atrayentes químicos liberados por tumores sólidos, las células inmunitarias como los macrófagos asociados a tumores o TAM se infiltran en los tumores sólidos. Posteriormente, estos TAM facilitan la progresión tumoral.
Para estudiar las interacciones entre los TAM y las células tumorales in vitro, comience tomando una placa de pocillos múltiples con un inserto membranoso. Esta disposición separa temporalmente el pozo en dos compartimentos.
A continuación, agregue una suspensión de TAM al compartimento superior del transwell.
Complemente el compartimento inferior del transpozo con un medio acondicionado enriquecido con atrayentes químicos secretados por las células tumorales.
Incube la placa durante el tiempo deseado.
Durante la incubación, los moduladores químicos atraen a los TAM. Esto conduce al movimiento de TAM hacia el compartimento inferior a través de la membrana de inserción porosa a través de la quimiotaxis inducida por productos químicos.
Ahora, retire el inserto del pozo. Transfiera el medio acondicionado que contiene la población TAM migrante a una placa adecuada para la medición fluorescente.
Trate las células con un tampón de lisis que contenga u
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